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第三代試管嬰兒核心——NGS技術(shù)解密!

發(fā)布時(shí)間:2025-12-18 10:45:38 作者:試管專家

   
第三代試管嬰兒核心——NGS技術(shù)解密!
   第三代試管嬰兒核心——NGS技術(shù)解密!
第三代試管嬰兒核心——NGS技術(shù)解密!第代

  第三代試管嬰兒技術(shù)又稱胚胎植入前遺傳學(xué)診斷(PGD),試管術(shù)解是嬰兒指在胚胎移植前,取胚胎的核心遺傳物質(zhì)進(jìn)行分析,診斷是第代否有異常。它可以很好地篩選健康胚胎進(jìn)行移植,試管術(shù)解有效防止遺傳病的嬰兒產(chǎn)生。

第三代試管嬰兒核心——NGS技術(shù)解密!

  

  胚胎植入前遺傳學(xué)篩查(PGS)的核心大概流程如上圖所示,精子和卵母細(xì)胞在體外結(jié)合成受精卵,第代在體外培養(yǎng)環(huán)境中進(jìn)一步發(fā)育至二細(xì)胞期、試管術(shù)解八細(xì)胞期、嬰兒囊胚期,核心我們可提取極體、第代卵裂球細(xì)胞或者滋養(yǎng)外胚層細(xì)胞進(jìn)行活檢,試管術(shù)解利用遺傳學(xué)檢測(cè)分析技術(shù)對(duì)活檢材料進(jìn)行遺傳學(xué)篩查,嬰兒最終挑選染色體整倍體的胚胎移植入患者宮腔,以期獲得活產(chǎn)。

  應(yīng)用于PGS的技術(shù)主要有兩個(gè)方面:

 ?。?)活檢技術(shù),包括第一、第二極體活檢、卵裂球細(xì)胞活檢、滋養(yǎng)外胚層細(xì)胞活檢等;

 ?。?)遺傳學(xué)分析技術(shù),包括熒光原位免疫雜交技術(shù)(FISH)、微陣列比較基因組雜交技術(shù)(aCGH)、單核苷酸多態(tài)性分析技術(shù)(aSNP)、實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)(realtimepolymerasechainreaction,rtPCR)、二代測(cè)序技術(shù)(NGS)等。

  極體活檢

  第一極體,產(chǎn)生于第一次減數(shù)分裂,其內(nèi)包含與卵母細(xì)胞相對(duì)應(yīng)的遺傳物質(zhì),通過第一極體活檢可間接對(duì)卵母細(xì)胞進(jìn)行遺傳學(xué)分析,以此預(yù)測(cè)早期胚胎中來源于母體的遺傳物質(zhì)。

  

  第二極體,產(chǎn)生于第二次減數(shù)分裂,通過第二極體活檢可用于驗(yàn)證檢測(cè)到的染色體異常,以及在第二次減數(shù)分裂中產(chǎn)生的錯(cuò)誤。

  卵裂期胚胎活檢與囊胚期胚胎活檢

  目前,在D3卵裂期胚胎提取1-2個(gè)卵裂球細(xì)胞進(jìn)行活檢,或在D5/D6囊胚期胚胎提取4-8個(gè)滋養(yǎng)外胚層細(xì)胞進(jìn)行活檢在臨床上的應(yīng)用最多,

  

  隨著現(xiàn)代分子生物學(xué)的發(fā)展,運(yùn)用于PGS的遺傳學(xué)分析技術(shù)也在不斷更新,

  由最初的PCR僅能檢測(cè)單位點(diǎn)的突變,發(fā)展到FISH技術(shù),可以檢測(cè)少數(shù)染色體,后來又出現(xiàn)芯片技術(shù),可以檢測(cè)所有染色的數(shù)目及結(jié)構(gòu)異常,到目前新興的二代測(cè)序技術(shù),可同時(shí)進(jìn)行染色體異常及單基因疾病的診斷。

  

  FISH技術(shù):

  熒光原位免疫雜交技術(shù)(FISH),是用于PGS的第一項(xiàng)遺傳學(xué)分析技術(shù)

  FISH技術(shù)有很多劣勢(shì):

  首先,F(xiàn)ISH技術(shù)僅能檢測(cè)有限數(shù)量的染色體,不能檢測(cè)全部染色體;

  其次,雜交失敗或信號(hào)重疊、散射等因素都會(huì)影響空間分辨率,進(jìn)而影響檢測(cè)結(jié)果的精確性。

  aCGH技術(shù):

  aCGH是第一項(xiàng)在全世界范圍內(nèi)廣泛應(yīng)用于PGS的技術(shù),

  aCGH的基本原理如下圖所示:

  

  aCGH的有效性已經(jīng)過科學(xué)證實(shí),具有較高的檢測(cè)精確度。并且其檢測(cè)效率較高,檢測(cè)速度較快,可在獲取活檢細(xì)胞后12h內(nèi)得到檢測(cè)結(jié)果。

  但是aCGH也有不足之處。

  首先,不可避免的存在等位基因脫扣以及優(yōu)先擴(kuò)增現(xiàn)象;

  其次,無法用于單親源性二倍體的檢測(cè);

  總結(jié)來說就是,aCGH不能完全規(guī)避風(fēng)險(xiǎn),即使通過aCGH檢測(cè),后期流產(chǎn)的風(fēng)險(xiǎn)仍然很高!

  NGS技術(shù):

  NGS的測(cè)序流程可以概括為文庫構(gòu)建、上機(jī)測(cè)序、數(shù)據(jù)分析三大步驟,其測(cè)序的基本原理為,通過擴(kuò)增胚胎的DNA,將其與人類基因組圖譜相比較,從而測(cè)定特定的DNA序列以及基因突變。

  NGS具有如下眾多優(yōu)勢(shì):

 ?。?)NGS為一項(xiàng)高通量測(cè)序技術(shù),可在一個(gè)實(shí)驗(yàn)中實(shí)現(xiàn)多個(gè)樣本同時(shí)檢測(cè),使得DNA測(cè)序成本降低成為可能;

  (2)隨著分辨率的提高,增強(qiáng)了對(duì)部分或節(jié)段性染色體非整倍體的檢測(cè)效率;

  (3)動(dòng)態(tài)范圍的增加,使得多細(xì)胞樣本的嵌合體檢出率增加;

  (4)高度自動(dòng)化,最大程度地減少了人為錯(cuò)誤以及操作時(shí)間,使得檢測(cè)結(jié)果更加精確。

  并且,已有多個(gè)研究驗(yàn)證了NGS檢測(cè)染色體非整倍體的效能。

  NGS技術(shù)一度被看作疾病預(yù)防最重要的科技突破,73種先天性以及遺傳性疾病檢測(cè)不僅可以大大降低疾病發(fā)生率,減少出生缺陷,還可以實(shí)現(xiàn)對(duì)疾病預(yù)測(cè)、預(yù)防、預(yù)警等。在給患者帶來更精確的檢測(cè)結(jié)果的同時(shí),也能實(shí)現(xiàn)優(yōu)生優(yōu)育,提高試管嬰兒成功率。

  當(dāng)前美國NGS技術(shù)在試管嬰兒領(lǐng)域的使用覆蓋率已經(jīng)很高,而泰國則只有為數(shù)不多的較為尖端的醫(yī)院才使用,所以去美國做試管,是最為穩(wěn)妥的選擇!

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